“中華醫學會病理學分會第二十一次學術會議暨第五屆中國病理年會”期間，中國醫學科學院腫瘤醫院病理科應建明教授分享了BRAF基因突變檢測在甲狀腺癌、結直腸癌等實體瘤鑒別診斷、治療指導及預后管理方面的重要意義，以及免疫組化BRAF V600E抗體檢測方法的臨床應用。

BRAFV600E突變檢測助力結直腸癌的鑒別診斷、治療指導和預后管理

根據WHO數據，結直腸癌（CRC）位列男性常見惡性腫瘤第三位和女性常見惡性腫瘤第二位，約5%~15%結直腸癌會發生BRAF位點特異性突變，其中超過90%為BRAF V600E突變。

BRAF V600E突變可排除林奇綜合征（LS），指示為散發型結直腸癌（SCRC）。BRAF V600E檢測有效簡化了LS診斷流程，采用錯配修復基因（MMR）蛋白免疫組化染色法篩查疑似患者。若MMR蛋白表達正常，可排除LS；MMR蛋白表達缺失時，需具體分析MLH1、MSH2、MSH6及PMS2四種蛋白表達情況。如MLH1缺失，則進行BRAF突變分析，若為V600E陽性預示很可能患有SCRC。歐洲臨床腫瘤學會（ESMO）和美國國立綜合癌癥網絡（NCCN）指南建議，MLH1基因缺失時應檢測BRAF V600E以排除SCRC。

BRAF V600E還可幫助臨床醫生進行CRC預后管理和指導治療。BRAF V600E突變導致CRC患者預后不良概率提升，尤其晚期患者V600E突變陽性預示預后非常差。盡管尚存在爭議，目前有限資料提示，V600E突變患者抗EGFR單抗治療應答率明顯低于BRAF野生型患者。

BRAF V600E檢測有效輔助甲狀腺癌診療及預后

對于甲狀腺癌，BRAF V600E突變發生在40%~70%甲狀腺乳頭狀癌（PTC）中，而在甲狀腺濾泡狀腺癌（FTC）、甲狀腺髓樣癌（MTC）和良性甲狀腺增生等中極少發現，BRAF V600E可作為PTC臨床鑒別診斷指標。因BRAF V600E與PTC惡性特征具有相關性，與腫瘤大小等高風險特征呈正相關，可輔助PTC診斷。采用甲狀腺細針穿刺活檢（FNAB）與BRAF V600E聯合檢測進行PTC診斷，敏感性可提升至80%。美國甲狀腺協會（ATA）管理指南建議，甲狀腺結節患者在細胞學活檢不確定時，建議使用分子標志物（如BRAF、RAS、RET/PTC等）輔助診斷。

BRAF V600E突變與PTC侵襲性及不良預后有關，可為PTC治療提供參考。術前檢查PTC的BRAF V600E基因突變可輔助預測術后復發風險、指導手術切除范圍及術后后繼治療。NCCN2014年第2版甲狀腺癌指南指出，腫瘤的組織學類型、腫瘤大小、局部浸潤及壞死、血管浸潤以及BRAF基因突變狀態和轉移是影響預后的重要變量。

免疫組化BRAF V600E（VE1）抗體檢測優化多項腫瘤診斷

近幾年來，免疫組化技術（IHC）用特異性抗體VE1識別V600E突變蛋白進行檢測，正逐漸成為當前BRAF基因突變常用檢測方法。第一屆中美腫瘤診斷病理高峰論壇期間，美國蓋辛格健康系統機構（Geisinger Health System）免疫組化實驗室主任陳宗明博士分享了一項對比IHC染色與分子生物學檢測方法研究。陳宗明博士表示：“進行BRAF V600E IHC檢測的關鍵在于確保檢測質量。以CRC診斷為例，BRAF特異性突變IHC檢測可通過IHC結果指導測序，具有更優的成本效益比。建議將BRAF V600E IHC檢測應用于LS、PTC等篩查，并定期評估其與分子生物學檢測間的一致性，做好質評與質控。”

2015年3月，《Nature》雜志《Scientific Reports》子刊發表了中國醫學科學院腫瘤醫院應建明教授團隊的研究，文章深入研究了Sanger測序、RT-PCR及IHC三種方法學在檢測實體瘤BRAF V600E突變中的一致性，使用羅氏診斷BRAF V600E（VE1）抗體，在VentanaBenchMark全自動染色平臺進行IHC檢測。779例患者中，150例VE1染色陽性。對349例患者進行Sanger測序及RT-PCR（cobas? 4800）檢測（包括150例VE1陽性病例）顯示，IHC方法學靈敏度和特異性分別為100%和99%，可作為BRAF突變檢測很好的初篩工具，并指導預后和治療方案。

作為率先用于體外診斷BRAF突變的即用型抗體，羅氏診斷BRAF V600E（VE1）抗體聯合OptiViewDAB IHC檢測試劑盒，對檢測多種腫瘤中單細胞水平BRAF V600E突變具有良好的敏感度和特異性。與現有分子檢測相比，BRAF V600E（VE1）抗體一種檢測即可適用于結直腸癌、甲狀腺癌、毛細胞白血病與其他多種癌癥中的BRAF V600E突變蛋白診斷，為解剖病理實驗室提供快速、準確的檢測結果。